Подарочные сертификаты
«Садко»
Роль перекисного стресса в патогенезе хронического эндометрита и возможности его коррекции
Авторы
Г. О. Гречканев, Т. М. Мотовилова, Н. Н. Никишов [и др.]
Цель исследования: установить характер воздействия озоно-бактериофаготерапии на перекисное окисление липидов (ПОЛ) и антиоксидантную систему защиты (АОСЗ) у больных хроническим эндометритом.
Материал и методы. Обследовано 80 пациенток в возрасте от 22 до 42 лет с гистологически подтвержденным хроническим эндометритом и различными нарушениями репродуктивной функции в анамнезе. 40 пациенткам проводилась озонотерапия в виде внутриматочных орошений озонированным физиологическим раствором с последующим введением в полость матки препарата комплексного пиобактериофага курсом пять процедур через день и внутривенных капельных инфузий озонированного физиологического раствора. Группа сравнения (40 пациенток) получала традиционное лечение в виде антибиотиков широкого спектра действия, комплексов витаминов, микроэлементов и физиотерапии. Оценка влияния различных вариантов лечения на систему ПОЛ-АОСЗ проводилась нами методом биохемилюминометрии по показателям Imax, S, tg2ά. Исследовались также уровни продуктов ПОЛ – диеновых конъюгатов (ДК), триеновых конъюгатов (ТК), и оснований Шиффа. Оценка АОСЗ проводилась на основе анализа активности антиоксидантных ферментов каталазы (Кат) и супероксиддисмутазы (СОД).
Результаты и обсуждение. Было установлено, что исходные значения изучаемых показателей отличались от нормальных – имело место усиление липопероксидации и сниженный уровень антиоксидантных ферментов. Под влиянием озоно-бактериофаготерапии произошло снижение Imax на 50,1%, S на 33,9%, tg2ά на 45%. Молекулярные продукты ПОЛ также уменьшились: ДК на 35,9%, ТК на 32,7%, ОШ на 45%. При этом активность Кат повысилась на 27%, а СОД – на 32%, что имеет важное патогенетическое значение для успеха лечения хронического эндометрита. Традиционное лечение такого эффекта не имело.
Заключение. При использовании озоно-бактериофаготерапии в комплексном лечении хронического эндометрита достигается выраженный эффект стимуляции активности антиоксидантных ферментов Кат и СОД, что имеет следствием подавление синтеза свободных радикалов.
Введение
Хронический эндометрит (ХЭ) является одной из наиболее актуальных проблем современной гинекологии [1, 2]. Ушли в прошлое дискуссии о самой возможности этой патологии, обсуждается роль различных инфектов в ее этиологии, при этом общепризнано, что ведущими факторами патогенеза ХЭ являются морфологические и функциональные нарушения эндометрия [3, 4]. Именно они обуславливают ассоциированные с ХЭ репродуктивные расстройства, включая привычное невынашивание беременности, бесплодие, неудачные попытки методов вспомогательной репродукции [2, 4]. Однако этим проблемы патогенеза ХЭ далеко не исчерпываются и включают, в частности, оксидативный стресс [5, 6], вообще присущий воспалительным заболеваниям женских половых органов.
Таким образом, налицо необходимость санации полости матки при ее микробной контаминации и персистирующем воспалительном процессе, с одной стороны, и целесообразность усиления антиоксидантной защиты организма – с другой [7–10]. Учитывая ранее полученные данные о возможности сочетать использование озон- и бактериофаготерапии [11, 12], нами было предпринято исследование в клинических условиях.
Цель исследования: установить характер воздействия озоно-бактериофаготерапии на перекисное окисление липидов (ПОЛ) и антиоксидантную систему защиты (АОСЗ) у больных хроническим эндометритом.
Материал и методы
В нашем исследовании приняли участие 80 пациенток в возрасте от 22 до 42 лет с гистологически подтвержденным хроническим эндометритом. Нарушения репродуктивной функции, а именно бесплодие, выкидыши, неразвивающиеся беременности и неудачные попытки ЭКО и ПЭ, были отмечены в анамнезе у всех пациенток. 90% больных имели перенесенные ранее инфекционно-воспалительные процессы различной локализации (кольпит, бактериальный вагиноз, пиелонефрит, цистит, колит, тонзиллит, синусит).
Микробиологическое исследование материала, полученного из полости матки, выявило микробные ассоциации из 2–3 микроорганизмов, представленных Staphylococcus spp., Enterococcus, E.coli, Streptococcus spp., Klebsiella, Actinomyces, Peptostreptococcus, Clostridium и демонстрировавших низкую чувствительность к основным группам антибиотиков.
Больные были случайным образом разделены на две равные по количеству группы, которые были сопоставимы по возрасту, семейному положению, социальному статусу, образованию, гинекологической и соматической патологии.
В I группе (40 пациенток) проводилась озонотерапия в виде внутриматочных орошений озонированным физиологическим раствором в количестве 400 мл (концентрация озона в озоно-кислородной смеси – 5000 мкг/л). В конце процедуры озонотерапии в полость матки вводили препарат комплексного пиобактериофага в объеме 4–7 мл через день № 5. После внутриматочной процедуры тампон, также смоченный препаратом, вводился в задний свод влагалища на 3–4 часа с целью предупреждения вытекания раствора и реализации антимикробного действия на слизистую оболочку влагалища. Данный биопрепарат активен в отношении восьми возможных, потенциально патогенных микроорганизмов, вызывающих воспалительные процессы различных локализаций. В те же дни (курсом пять процедур) больным внутривенно капельно вводили по 200 мл озонированного физиологического раствора, полученного при использовании насыщающей концентрации озона 1200 мкг/л озоно-кислородной смеси. II группа (40 пациенток) получала традиционное лечение в виде антибиотиков широкого спектра действия, комплексов витаминов, микроэлементов и физиотерапии.
Оценка влияния различных вариантов лечения на систему ПОЛ-АОСЗ проводилась нами методом скринига (биохемилюминометрия) по показателям Imax в mv/с (максимальная интенсивность свечения, соответствующая потенциальной способности сыворотки крови к свободнорадикальному окислению липидов), S в mv/с (светосумма за 30 секунд, отражающая содержание радикалов, соответствующих обрыву цепи свободнорадикального окисления) и tg2ά (показатель, характеризующий скорость спада процессов ПОЛ), которые обратно пропорциональны емкости АОСЗ. Исследовались также уровни продуктов ПОЛ – диеновых конъюгатов (ДК), триеновых коньюгатов (ТК), и оснований Шиффа (ОШ). Оценка АОСЗ проводилась на основе анализа активности антиоксидантных ферментов каталазы (Кат) и супероксиддисмутазы (СОД). Исследование проводили до начала и через 1 месяц после окончания лечения.
Результаты и их обсуждение
Нами было установлено, что изучаемые показатели биохемилюминометрии во всех группах до лечения превышали нормативы у большинства обследованных (таблица 1).
Так, показатель I max, отражающий активность ПОЛ, составил 2,52±0,13 mv/сек в I группе и 2,76±0,07 во II группе (р>0,05). Он был выше нормы (нормативные значения – 1,33±0,08 mv/сек) у 37 (92,5%) и 39 (97,5%) женщин, соответственно.
Показатель S находился в I группе на уровне 15,32±0,08 mv/сек, во II – 14,87±0,08 mv/сек (р>0,05) и был повышен (нормативные значения – 13,2±0,7 mv/сек), соответственно, у 35 (87,5%) и 37 (92,5%) больных.
Показатель tg2ά в I группе составил в среднем 0,62±0,03, во II группе 0,58±0,02, что не имеет достоверных отличий (р>0,05). Данный параметр был, соответственно, выше нормы (нормативные значения – 0,32±0,05) у 34 (85%) и 36 (90%) пациенток.
Исследование исходного содержания молекулярных продуктов ПОЛ показало, что ДК в крови пациенток в I группе находились на уровне 0,39±0,01 ед.опт.пл./мг ОЛ, во II – 0,41±0,03 ед.опт.пл./мг ОЛ (р>0,05). Повышенным уровень ДК (нормативные значения 0,22±0,02 ед.опт.пл./ мг общ. липидов) был, соответственно, у 36 (90%) и 37 (92,5%) больных.
Исходный уровень ТК составлял, соответственно, 0,049±0,003 ед.опт.пл./мг ОЛ и 0,052±0,004 ед.опт.пл./ мг ОЛ, что достоверно не отличается (р>0,05). Он был выше нормы (нормативные значения – 0,027±0,002 ед. опт.пл./мг общ. липидов) у 32 (80%) женщин I группы и 33 (82,5%) женщины II группы.
Содержание ОШ было следующим: в I группе 20,47±0,12 усл.ед./мг ОЛ, во II – 22,32±0,11 усл.ед./мг ОЛ, что не имеет достоверных отличий (р>0,05). Превышение нормы (нормативные значения – 15,3±0,12 отн. ед./мг общ. липидов) имело место у 38 (95%) пациенток I группы и 37 (92,5%) пациенток II группы (таблица 2).
Как оказалось, исходно активность Кат и СОД не имела отличий в обеих группах больных (таблица 3). Активность Кат (нормативные значения – 508,0±18,6) в I группе составила 412,0±5,7 Ед/г Нв в мин, во II – 403,4±6,3 Ед/г Нв в мин (р>0,05) и была ниже нормы, соответственно, у 97,5% и 90% женщин. СОД (нормативные значения – 586,0± 22,4 Ед/г Нв в мин) находилась в I группе на уровне 392,2±5,7 Ед/г Нв в мин, во II – 386,5±9,1 Ед/г Нв в мин, что не имеет достоверных отличий (р>0,05). Уменьшение активности данного фермента было установлено, соответственно, у 38 (95%) и 40 (87,5%) женщин.
В совокупности эти данные свидетельствуют об ослаблении антиокислительного потенциала организма и усилении липопероксидации на фоне даже латентно протекающего воспалительного процесса, что может служить почвой для клинической манифестации, спровоцированной какимилибо внешними факторами [1, 5, 6].
Проводимое лечение показало различную эффективность в отношении влияния на показатели ПОЛ-АОСЗ. Так, Imax в I группе уменьшился до 1,25±0,04 mv/сек (р<0,05), т. е. на 50,1%.
Нормальные значения Imax после лечения имели место у 35 (87,5%) женщин. Во II группе изменения показателя были недостоверными, в связи с чем показатель оставался повышенным у 31 (77,5%) пациентки (рис. 1).
Уровень S в I группе при контрольном исследовании составил 10,12±0,04 mv/сек, что ниже исходного на 33,9% (p<0,05), во II группе данный показатель не изменился.
Показатель tg2ά в I группе после лечения составил 0,34±0,01, что меньше исходного на 45% (p<0,05). У пациенток II группы значимые изменения отсутствовали.
Динамика изменений молекулярных продуктов ПОЛ также зависела от характера проводимого лечения (таблица 2). Так, уровень ДК в I группе уменьшился до 0,25±0,02 ед. опт.пл./мг ОЛ (р<0,05), т. е. на 35,9%. Во II группе изменений показателя не было.
Однонаправленной была динамика изменений уровня ТК в I группе, он уменьшился до 0,033±0,002 ед.опт.пл./мг ОЛ, т. е. на 32,7% (р<0,05), во II группе он не изменился.
ОШ в I группе уменьшились на 45% до 11,16±0,08 усл. ед./мг ОЛ (рис. 2), что привело к нормализации показателя у 31 (77,5%) больной.
Во II группе больных за счет отсутствия достоверного снижения уровень ОШ оказался выше, чем в I группе (p<0,05) и превышал норму (по данным анализа индивидуальных показателей) у 37 (92,5%) пациенток, как и до лечения (рис. 3).
Для раскрытия механизмов нормализации процессов липопероксидации целесообразным является исследование активности антиоксидантных ферментов, в частности каталазы и супероксиддисмутазы, поскольку они являются важнейшими компонентами АОСЗ и лимитируют развертывание ПОЛ.
Как показало динамическое наблюдение (рис. 4, 5) за уровнями активности антиоксидантных ферментов достоверные изменения происходили только в I группе больных и проявлялись в их очевидном росте.
В I группе активность Кат повысилась на 27% до 524,5±9,6 Ед/г Нв в мин (р<0,05), а СОД – на 32% до 517,44±12,0 Ед/г Нв в мин (р<0,05). Во II группе достоверных изменений показателей не произошло, вследствие чего они были достоверно ниже соответствующих величин I группы (р<0,05 во всех случаях).
Благодаря озоно-бактериофаготерапии количество больных с недостаточностью Кат и СОД оказалось в I группе минимальным. За счет роста активности Кат в I группе нормализация показателя была достигнута у 35 (87,5%), а СОД – у 34 (85%) женщин (рис. 6, 7).
Во II группе низкий уровень Кат оставался у 36 (90%), СОД у 35 (87,5%) пациенток.
Общепризнано, что универсальным механизмом развития всех патологических процессов, в том числе и воспалительных заболеваний гениталий, является оксидативный стресс [5, 6, 13, 14]. Данное явление имеет место в ответ на повреждающее действие инфекционного агента и усугубляется массивной многокомпонентной фармакотерапией, срывом систем детоксикации. Неконтролируемое накопление свободных радикалов ведет к дезинтеграции как внутриклеточных, так и мембранных и околомембранных процессов, что вызывает нарушение тканевого дыхания, формирование неадекватных адаптационных реакций в тканях, не является исключением и эндометрий [15]. Нами было подтверждено, что параметры ПОЛ-АОСЗ у больных хроническим эндометритом находятся вне диапазона нормативных значений, что свидетельствует о наличии перекисного стресса, требующего коррекции. Наблюдения в динамике показали, что изучаемые показатели находятся в зависимости от используемого лечения. При условии озоно-бактериофаготерапии достигается выраженный эффект стимуляции активности антиоксидантных ферментов Кат и СОД, что имеет следствием подавление синтеза свободных радикалов. Об этом свидетельствуют как данные мониторинга биохемилюминометрических показателей, так и молекулярных продуктов липопероксидации. Данный эффект, очевидно, обусловлен системным влиянием озона (как при внутривенном введении озонированного физраствора, так и трансэндометриально), поскольку фаги подобными свойствами не обладают.
Традиционное лечение без использования средств коррекции липопероксидации сопровождалось сохранением стабильно низких уровней АОСЗ и высоких величин ПОЛ.
Таким образом, одним из важных патогенетических механизмов озоно-бактериофаготерапии является усиление антирадикальной защиты организма.
ЛИТЕРАТУРА
1. Зароченцева Н.В., Аршакян А.К., Меньшикова Н.С., Титченко Ю.П. Хронический эндометрит: этиология, клиника, диагностика, лечение. Российский Вестник акушера-гинеколога. 2013. № 5. С. 21-27. Zarochenceva N.V., Arshakjan A.K., Men'shikova N.S., Titchenko Ju.P. Hronicheskij jendometrit: jetiologija, klinika, diagnostika, lechenie. Rossijskij Vestnik akushera-ginekologa. 2013. № 5. S. 21-27.
2. Тапильская Н.И., Карпеев С.А., Кузнецова И.В. Хронический эндометрит — субклиническое воспалительное заболевание органов малого таза. Гинекология. 2014. № 1. С. 104-109. Tapil'skaja N.I., Karpeev S.A., Kuznecova I.V. Hronicheskij jendometrit – subklinicheskoe vospalitel'noe zabolevanie organov malogo taza. Ginekologija. 2014. № 1. S. 104-109.
3. Bartlett E.C., Levison W.B., Munday P.E. Pelvic inflammatory disease. BMJ. 2013. 346 р.
4. Краснопольский В.И., Логутова Л.С., Зароченцева Н.В., Дуб Н.В., Титченко Ю.П. и др. Прегравидарная подготовка женщин с невынашиванием беременности и хроническим эндометритом. Учебное пособие. СПб. 2014. 31 с. Krasnopol'skij V.I., Logutova L.S., Zarochenceva N.V., Dub N.V., Titchenko Ju.P. i dr. Pregravidarnaja podgotovka zhenshhin s nevynashivaniem beremennosti i hronicheskim jendometritom. Uchebnoe posobie. SPb. 2014. 31 s.
5. Столярова У.В., Рогожина И.Е., Хворостухина Н.Ф. и др. Особенности иммунных и оксидантных нарушений у больных с воспалительными заболеваниями органов малого таза //Мать и дитя: мат-лы V Регионального научного форума. Геленджик. 2011. С. 269-270. Stoljarova U.V., Rogozhina I.E., Hvorostuhina N.F. i dr. Osobennosti immunnyh i oksidantnyh narushenij u bol'nyh s vospalitel'nymi zabolevanijami organov malogo taza // Mat' i ditja: мat-li V Regional'nogo nauchnogo foruma. Gelendzhik. 2011. S. 269-270.
6. Виноградова О.П., Кузнецова М.Н. Компоненты антиоксидантной защиты при воспалительных заболеваниях органов малого таза в гинекологии // Мать и дитя: мат-лы VII Регионального научного форума. Геленджик. 2014. С. 192-193. Vinogradova O.P., Kuznecova M.N. Komponenty antioksidantnoj zashhity pri vospalitel'nyh zabolevanijah organov malogo taza v ginekologii // Mat' i ditja: мat-li VII Regional'nogo nauchnogo foruma. Gelendzhik. 2014. S. 192-193.
7. Гомболевская Н.А., Марченко Л.А., Муравьева В.В. Состав микрофлоры эндометрия у женщин с хроническим эндометритом // Мат-лы XXV Междунар. конгресса с курсом эндоскопии «Новые технологии в диагностике и лечении гинекологических заболеваний» 5-8 июня 2012 г. С. 80. Gombolevskaja N.A., Marchenko L.A., Murav'eva V.V. Sostav mikroflory jendometrija u zhenshhin s hronicheskim jendometritom // Mat-li XXV Мezhdunar. kongressa s kursom jendoskopii «Novye tehnologii v diagnostike i lechenii ginekologicheskih zabolevanij» 5-8 ijunja 2012 g. S. 80.
8. Sharma Н., Tal R., Clark N.A., Segars J.H. Microbiota and pelvic inflammatory disease. Semin. Reprod. Med. 2014. Vol. 32 (1). Р. 43-49.
9. Wiesenfeld H.C., Hillier S.L., Meyn L.A., Amortegui A.J., Sweet R.L. Subclinical pelvic inflammatory disease and infertility. Obstet. Gynecol. 2012. № 120. Р. 37-43. 10. Sharma Н., Tal R., Clark N.A., Segars J.H. Microbiota and pelvic inflammatory disease. Semin. Reprod. Med. 2014. Vol. 32 (1). Р. 43-49.
11. Гречканев Г.О. Технологии озонотерапии в акушерстве и гинекологии. Н. Новгород: Изд-во НижГМА, 2016. 384 с. Grechkanev G.O. Tehnologii ozonoterapii v akusherstve i ginekologii. N. Novgorod: Izd-vo NizhGMA, 2016. 384 s.
12. Гречканев Г.О., Мотовилова Т.М., Горшунова Л.Г., Пономарева И.В., Никишов Н.Н. и др. Сочетанное местное применение медицинского озона и бактериофагов в лечении женщин с воспалительными заболеваниями гениталий (экспериментальное обоснование). Российский вестник акушера-гинеколога. 2016. № 1. С. 17-20. Grechkanev G.O., Motovilova T.M., Gorshunova L.G., Ponomareva I.V., Nikishov N.N. i dr. Sochetannoe mestnoe primenenie medicinskogo ozona i bakteriofagov v lechenii zhenshhin s vospalitel'nymi zabolevanijami genitalij (jeksperimental'noe obosnovanie). Rossijskij vestnik akushera-ginekologa. 2016. № 1. S.17-20.
13. Некрасов Э.В. Методы анализа перекисного окисления липидов в медико-биологических исследованиях // Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2012. № 46. С. 99-101. Nekrasov Je.V. Metody analiza perekisnogo okislenija lipidov v mediko-biologicheskih issledovanijah // Bjul. fiziol. i patol. dyhanija. 2012. № 46. S. 99-101.
14. Гречканев Г.О., Мотовилова Т.М., Гаревская Ю.А., Чурикова М.С., Бойченко Т.А., Никишов Н.Н. Антиоксидантная терапия – важнейший компонент патогенетического лечения воспалительных заболеваний. Врач. 2015. № 3. С. 54. Grechkanev G.O., Motovilova T.M., Garevskaja Ju.A., Churikova M.S., Bojchenko T.A., Nikishov N.N. Antioksidantnaja terapija – vazhnejshij komponent patogeneticheskogo lechenija vospalitel'nyh zabolevanij. Vrach. 2015. № 3. S. 54.
15. Городецкая О.С., Чандра-Д’Мелло Р., Гречканев Г.О. Показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы защиты у пациенток с хроническим неспецифическим эндометритом. Вятский мед. вестник. 2010. № 4. С. 27-28. Gorodeckaja O.S., Chandra-D’Mello R., Grechkanev G.O. Pokazateli perekisnogo okislenija lipidov i antioksidantnoj sistemy zashhity u pacientok s hronicheskim nespecificheskim jendometritom. Vjatskij med. vestnik. 2010. № 4. S. 27-28.
